CHO细胞培养
FreeStyle™ MAX CHO 表达系统
FreeStyle™ MAX CHO 表达系统是完全非动物源性的蛋白质表达系统,可通过悬浮培养的 FreeStyle™ CHO-S 细胞进行可调式大规模瞬时转染和蛋白质生产。FreeStyle™ CHO-S 细胞是经过适应性改造的中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞,适合在 FreeStyle™ CHO 表达培养基中进行无血清培养。转染和表达实验可在 FreeStyle™ CHO 表达培养基中直接进行,无需更换培养基。FreeStyle™ MAX CHO 表达系统所含试剂可供 25 次转染和 1 次对照转染试验之用,转染容量为 30 ml,要进行更大规模的转染,只需按比例增加试剂即可。就产量而言,FreeStyle™MAX CHO 表达系统生产出微克量的蛋白质只需数天而非数月的时间。
FreeStyle™ MAX CHO 表达系统包含以下主要成分:
• FreeStyle™ MAX 试剂 — 该转染试剂用于悬浮培养的Free-Style™ CHO-S 细胞时具有很高的转染效率。
• FreeStyle™ CHO-S 细胞 — 该细胞系适于在 FreeStyle™ CHO表达培养基中进行高密度的无血清悬浮培养,能够产生高水平的重组蛋白。CHO 细胞可对蛋白质进行稳定、准确的糖基化,便于下游的临床前和治疗性应用。
• FreeStyle™ CHO 表达培养基 — 该培养基为成分确定的无血清培养基,专为 FreeStyle™ CHO-S 悬浮细胞的生长和大规模转染设计。
• OptiPRO™ 无血清培养基,提供促进 DNA-脂质体复合物形成的优化条件。
建议储存条件:FreeStyle™ CHO 细胞,液氮内储存;FreeStyle™MAX 试剂,4°C 下储存,不可冷冻;FreeStyle™ CHO 表达培养基和OptiPRO™ 无血清培养基,4°C 下避光储存;pCMV•SPORT-β-gal 对照载体,–20°C 下储存。
CHO 表达产品
CD OptiCHO™ 培养基
适合重组 CHO 细胞的化学成分确定 (CD) 的培养基。经过特殊设计的 CD OptiCHO™ 培养基可使重组 CHO 细胞在化学成分确定的环境中发挥很好的性能,达到很高的产量。这种无蛋白、非动物源性配方品质稳定,性能可靠,减少了筛查外源性物质的工作。
• 经过优化设计,可支持并且很大限度地促进重组 CHO 细胞在悬浮培养体系中的生长和蛋白质表达
• 对于所选细胞系和应用领域,该产品可使细胞生长和蛋白质产量比现有培养基提高 40%
• 真正的化学成分确定、无蛋白配方,不含水解物,提高了批次间的一致性和可靠性。建议储存条件:2°C 至 8°C 下避光储存。正确储存时可稳定保存12 个月。
CD CHO 培养基 (1X),液体
CD CHO 培养基是一种化学成分确定的无蛋白培养基,适合悬浮培养的中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞的生长和重组蛋白的表达。CD CHO培养基不含动物、植物源性或者合成的蛋白质和肽类成分。配方中也不含成分不明的裂解物和水解物。
• CD CHO 培养基不含次黄嘌呤和胸苷,因此可用于二氢叶酸还原酶 (DHFR) 扩增系统;用于其他领域时,使用前应向每升培养基中加入 10 ml HT 添加剂 (货号:11067-030)
• 为了提高稳定性,该配方不含 L-谷氨酰胺;使用前应向每1,000 ml 培养基中加入 40 ml 200 mM 的 L-谷氨酰胺
建议储存条件:2°C 至 8°C 下避光储存。
说明:CHO 培养基主文件已提交至 FDA。要引用该主文件,可与Invitrogen 公司技术支持部门或者您当地的销售代表联系,获得许可。
CD CHO AGT™
CD CHO AGT™ 是一种化学成分确定的新型无蛋白培养基,呈颗粒状,使用方便。CD CHO AGT™ 培养基适合悬浮培养的中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞的生长和重组蛋白的表达。
建议储存条件:2°C 至 8°C 下避光储存。
CHO-S-SFM II
CHO-S-SFM II 是一种无血清、低蛋白 (蛋白含量低于 100 μg/ml) 的完全培养基,适合悬浮培养的中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞的生长和维持以及 CHO 细胞中重组蛋白的合成。1,2 这种即用型培养基可用于分批、连续和灌注培养系统中,适合 CHO 及其他细胞的悬浮培养。
建议储存条件:2°C 至 8°C 下避光储存。
说明:CHO 培养基主文件已提交至 FDA。要引用该主文件,可与Invitrogen 公司技术支持部门或者您当地的销售代表联系,获得许可。
定制式 CHO 培养基产品
我们提供几种非现货供应但可按订单生产方式供货的 CHO 配方。我们知道客户的需求并非一成不变,因此,我们能够为客户提供他们需要的产品配置 (配方和包装),同时我们的营运系统也能确保这些产品的及时供应。如果您要选择最适合自己需求的产品,请与我们的定制产品服务组联系,他们会为您提供帮助。
定制产品可采用多种包装方式,例如:普通 PET 瓶 (100 ml、500ml 和 1,000 ml) 以及定制式培养基包装袋 (1 L、5 L、10 L 和 200L)。
我们提供以下定制产品:
贴壁 CHO-SFM:适用于贴壁依赖性 CHO 系统。
CHO-III-PFM:该培养基完全不含动物源性原料,基本不含蛋白质,为了提高性能,加入了植物水解物。
说明:CHO-III-PFM 主文件已提交至 FDA。要引用该主文件,可与 Invitrogen 公司技术支持部门或者您当地的销售代表联系,获得许可。
请注意,对于上述产品的改进配方、DMEM/F-12、F-12 营养培养基和 MCDB 301 等经典培养基以及您自行研制的配方,我们均可按照您的具体选择/扩增体系 (DHFR、谷氨酰胺合成酶、新霉素抗性等) 进行调整。
CHO CD EfficientFeed™ 试剂盒
CHO CD EfficientFeed™ 试剂盒可帮助您快速、高效地确定营养添加剂配方,与分批培养相比,可将分批补料培养的产量提高 2 至 5倍,此外,还可帮助您快速开发出生物反应器的种细胞储备。该试剂盒含有营养添加剂 A 和 B,其配制依据是已经取得成功的化学成分确定的培养基配方,可能您正在使用该配方,或者正在考虑将其用作您的分批培养基 (CD OptiCHO™ 培养基或 CD CHO 培养基)。
建议储存条件:2°C 至 8°C 下避光储存。
DG44 表达产品
DG44 细胞和培养基试剂盒
DG44 细胞和培养基试剂盒适用于悬浮培养的二氢叶酸还原酶缺陷型(DHFR–) 中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞的生长和重组蛋白的表达。该试剂盒中包括 CD DG44 培养基以及适合此培养基的 DG44 细胞。CD DG44 培养基是一种化学成分确定的无蛋白培养基,可使悬浮培养的DG44 细胞获得较好的生长和蛋白表达效果。这种精心选择的细胞具有良好的生长性和转染效率。此外,DG44 细胞和培养基试剂盒中还包括 L-谷氨酰胺和 PluronicR F-68,以便 DG44 细胞在无蛋白、化学成分确定的环境中获得最佳的生长和蛋白质表达性能。
建议储存条件:CD DG44 培养基,2°C 至 8°C 下避光储存;DG44 细胞,液氮中储存;L-谷氨酰胺,–5°C 至 –20°C 下储存;PluronicRF-68,15°C 至 30°C 下储存。
说明:CHO 培养基主文件已提交至 FDA。要引用该主文件,可与Invitrogen 公司技术支持部门或者您当地的销售代表联系,获得许可。
Pluronic 是 BASF 公司的注册商标。
OptiCHO™ 表达产品试剂盒
• 用于表达载体构建、 DG44 细胞的高效转染以及开发用于蛋白质表达的稳定细胞系
• 使二氢叶酸还原酶缺陷型 (DHFR–) 中国仓鼠卵巢 (CHO)DG44 细胞在悬浮培养中高效生长和转染
该试剂盒包含完整的工作流程方案,以及 DHFR– DG44 细胞在无血清环境中高效转染及后续的稳定细胞系开发所需的全部材料,包括:
• pOptiVEC™-TOPOR 载体 — 含有 DHFR 基因的双顺反子克隆载体,用于 CHO-DG44 细胞稳定细胞系的开发;该载体适合 TOPOR 技术操作,能够以 85% 以上的效率克隆含有目的基因的 PCR 产品
• FreeStyle™ MAX 试剂 — 非动物源性转染试剂,具有很高的转染效率和一致的实验结果
• CD OptiCHO™ 培养基 — 化学成分确定的无蛋白培养基 (不含次黄嘌呤和胸苷),适合重组 CHO-DG44 细胞的高密度悬浮培养和分泌型蛋白生产
• CD DG44 培养基 — 化学成分确定的无蛋白培养基,为了使 DG44 细胞在悬浮培养中获得较好的生长效果,添加了次黄嘌呤和胸苷
• DG44 细胞 — 这种精心选择的细胞适合 CD DG44 培养基,具有出色的生长性和转染效率
此外,OptiCHO™ 表达产品试剂盒中还包括可促进 DNA-脂质体复合物形成的 GIBCOR OptiPRO™ SFM、可提高培养基稳定性的 L-谷氨酰胺 (单独提供) 以及用于控制悬浮培养体系中剪切力的 PluronicR F-68。
建议储存条件:PluronicR F-68,15°C 至 30°C 下储存;CD DG44培养基、OptiPRO™ SFM、CD OptiCHO™ 培养基和 FreeStyle™ MAX试剂,2°C 至 8°C 下避光储存;L-谷氨酰胺、pOptiVEC™-TOPOR 载体、CMV 正向测序引物和 EMCV IRES 反向测序引物,–5°C 至 –20°C下储存;One ShotR TOP10 化学感受态大肠杆菌细胞,–80°C 下储存;DG44 细胞,液氮中储存。
OptiCHO™ 抗体表达产品试剂盒
• 用于抗体表达用无血清细胞系的开发和克隆
• 利用悬浮培养的二氢叶酸还原酶缺陷型 (DHFR–) 中国仓鼠卵巢 (CHO) DG44 细胞进行抗体表达用无血清细胞系的快速开发和克隆 (图 1)。
该试剂盒包含完整的工作流程方案 (图 1) 和使用手册,以及 DHFR–DG44 细胞在无血清环境中高效转染和克隆及后续的抗体生产用稳定细胞系开发所需的全部材料。该试剂盒中包括:
• 两种轻链和重链表达载体 — pOptiVEC™-TOPOR 双顺反子克隆载体和 pcDNA™3.3 TOPOR 克隆载体 (图 2);该载体适合TOPOR 技术操作,能够以 85% 以上的效率克隆含有目的基因的 PCR 产品
• FreeStyle™ 试剂 — 非动物源性转染试剂,具有很高的转染效率和一致的实验结果
• CD OptiCHO™ 培养基 — 化学成分确定的无蛋白培养基 (不含次黄嘌呤和胸苷),适合重组 CHO DG44 细胞的高密度悬浮培养和分泌型蛋白生产
• CD DG44 培养基 — 化学成分确定的无蛋白培养基,为了使DG44 细胞在悬浮培养中获得较好的生长效果,添加了次黄嘌呤和胸苷
• DG44 细胞 — 这种精心选择的细胞适合 CD DG44 培养基,具有出色的生长性和转染效率
此外,OptiCHO™ 表达产品试剂盒中还包括可促进 DNA-脂质体复合物形成的 GIBCOR OptiPRO™ SFM、用于 DHFR– 选择的 GeneticinR选择性抗生素 (G-418)、可提高培养基稳定性的 L-谷氨酰胺 (单独提供) 以及用于控制悬浮培养体系中剪切力的 PluronicR F-68。
建议储存条件:PluronicR F-68,15°C 至 30°C 下储存;CD DG44培养基、OptiPRO™ SFM 和 CD OptiCHO™ 培养基,2°C 至 8°C 下避光储存;FreeStyle™ MAX 试剂,2°C 至 8°C 下储存;GeneticinR选择性抗生素,–5°C 至 –20°C 或者 2°C 至 8°C 下储存;L-谷氨酰胺、pcDNA™3.3-TOPOR TA CloningR 试剂盒和 pOptiVEC™-TOPOR TA CloningR 试剂盒,–5°C 至 –20°C 下储存;One ShotR TOP10 化学感受态大肠杆菌细胞,–80°C 下储存;DG44 细胞,液氮中储存。