转染、选择和蛋白质传递技术概述
简单、快速、可靠地将 DNA、siRNA、RNA 和蛋白质传递到哺乳动物细胞中,对于实验结果的取得极为关键。转染技术方面的进展使研究人员能够快速发现新的基因,快速阐明基因功能。转染:试剂介导的转染是一种快速、简单而且重复性好的方法,可方便地将 DNA、RNA、siRNA 或寡核苷酸转入真核细胞内 (图 1)。与 DEAE-右旋糖酐和磷酸钙沉淀法转染相比,利用 Lipofectamine™LTX、FreeStyle™ MAX 和 Lipofectamine™ 2000 等试剂进行转染的效果更佳,适用于蛋白质瞬时表达和高表达性稳定细胞系的构建。Invitrogen 公司转染试剂性能出色,稳定可靠。这些试剂适用于多种细胞类型 (包括:贴壁细胞、悬浮细胞、昆虫细胞和原代培养细\胞) 的高效转染 (表 1)。Invitrogen 公司所有转染试剂均配有最新的实验流程,使用方便。许多试剂还配有高通量实验流程。选择试剂:转染试剂需要与适当的选择试剂 (即 GeneticinR、潮霉素、杀稻瘟菌素或 Zeocin™) 配合使用。蛋白质易位:借助 Voyager™ 技术,可将活性融合蛋白经过真核细胞膜转入细胞内。Voyager™ 技术是以单纯疱疹病毒蛋白 VP22 的性质为基础开发的。通过 Voyager™ 易位技术,可以在一些十分难以转染的细胞中研究目的蛋白的功能。利用 Voyager™ 易位,可以获得完全纯正的细胞群体,因为所有细胞都会含有易位的蛋白质。易位的蛋白质进入细胞后,可立即进行研究。融合蛋白可在真核细胞或大肠杆菌中构建。